قشور غ، محمودی م، راستین م، رفعت‌پناه ه، رضائی س، فرید حسینی ر، شیردل ع، رحیمی ح، كوشیار

اولین كنگره بین المللی HTLV-І و بیماریهای وابسته در ایران، 29 بهمن تا اول اسفند 1388، مشهد، ایران، س- 50

غاده غشور، شادى صرافان، محمود محمودى، مریم راستین، هوشنگ رفعت‌پناه، عبدالرحیم رضایی، رضا فرید حسینی، عباس شیردل، حسین رحیمى، كوشیار

هفتمین همایش بروهشى سالیانه دانشجویان دانشگاه‌هاى علوم پزشكى شرق كشور، 25 تا 27 آبان ماه 1397، مشهد، ایران

فصلنامه علمى پژوهشى نوید نو، دوره 15، شماره ٥٣، بایبز ١٣٩٠

مقدمه: ویروس لنفوتروپیک انسانى نوع یک باعث ایجاد دو نوع بیمارى اسپاستیک ناشى از میلوپاتى وابسته به ویروس لنفوسیت هاى T انسانى نوع ١ (I-HTLV) و لوسمى لنفوم سلولT بزرگسالان (ATL) می‌گردد. ATL به شیمى درمانى مقاوم است.

روش بررسی: در این مطالعه ما به بررسی اثر و كارایى تركیبى از ارسنیك اینترفرون الفا و زیدوودین در ATL مزمن تازه تشخیص پرداختیم. در این مطالعه ماركرهاى فنوتیپى T cell در ٢٨ بیمار با یافته‌هاى كلینیكى ATL مراجعه كننده به بخش خون‌شناسى، سرطان‌شناسى بیمارستان قائم و امام رضا مشهد در مهرماه ١٣٨٥ تا تیرماه ١٣٨٧ آنالیز شدند. همچنین 10 نفر حامل سالم HTLV-I و 10 نفر I-HTLV داراى آزمایش منفى I-HTLV به عنوان كنترل سالم از مراجعه كنندگان به بانك خون مشهد مورد بررسى قرار گرفتند. بعد از پایان رژیم درمانى اولیه بیماران تحت درمان زیدوودین  (900-300 روز/میلی گرم)، ارسنیك (10 روز/میلی گرم و 5 هفته/ روز) و اینترفرون آلفا (5-3 روز/ میلیون IU) قرار گرفتند. بعد از یك ماه از درمان دومین نمونه خون از آن‌ها گرفته شد و مورد آزمایش قرار گرفت و بررسى‌هاى كلینیكى شد.

نتیجه‌گیرى: آنالیز فتوسایتومترى خون محیطى نشان داد كه در همه بیماران سلول توموری CD4+، CD8- و CD25+ بود.

واژه‌های کلیدی: ارسنیك ترى اكسید، اینترفرون آلفا، زیدوودین، لوسمی لنفوم سلول T بزرگسالان

راشین گنجعلی، جلیل توكل افشاری، محمد رضا آذر پژوه، هوشنگ رفعت‌پناه، نرگس ولیزاده، اعظم بروك، محسن تهرانی

اولین كنگره بین المللی HTLV-І و بیماریهای وابسته در ایران، 29 بهمن تا اول اسفند 1388، مشهد، ایران، س- 35

ویتامین D به علت دارا بودن خصوصیات تنظیم كنندگی سیستم ایمنی، نقش مهمی از لحاظ وضعیت كلینیكی افراد آلوده به ویروس HTLV دارد. هدف از مطالعه حاضرتعیین ارتباط بین پلی مورفیسم ژن گیرنده ویتامین Dبا وضعیت كلینیكی افراد آلوده به ویروس HTLV-1 میباشد.

مواد و روش ها: DNA ژنومی از خون كامل 55 فرد HAM/TSP، 113 فرد ناقل مراجعه كننده به بیمارستان قائم و 148 فرد سالم مراجعه كننده به سازمان انتقال خون مشهد استخراج گردید. ژنوتیپ همه نمونه ها در 4 جایگاه Bsm I، Apa I، Fok I و Taq I با استفاده از تكنیك RFLP-PCR تعییین گردید. ارتباط بین این پلی مورفیسم ها و وضعیت بیماری و توسط نرم افزار آماری Stata 6 مورد ارزیابی قرار گرفت.

نتایج: فراوانی آلل “f” جایگاه  Fok Iدر HAM/TSP، ناقل و سالم به ترتیب 26%، 29% و 6/23%، فراوانی آلل “a” جایگاه  Apa I در HAM/TSP، ناقل و سالم به ترتیب 7/28%، 31% و 5/36% بود. فراوانی آلل “b” جایگاه  Bsm Iدر HAM/TSP، ناقل و سالم به ترتیب 56%، 8/45% و 9/63% بود. فراوانی آلل “t” جایگاه  Taq Iدر HAM/TSP، ناقل و سالم به ترتیب 4/32%، 1/33% و 8/24% بود.

بحث و نتیجه گیری: مطالعات ما نشان داد كه كه فراوانی آللی جایگاه Bsm I در بین HAM/TSP و گروه سالم تفاوت معنی داری وجود دارد (oR=1.73، p=.01). همچنین بین گروه ناقل و گروه سالم (oR=1.73، p=.00). نتایج این آزمایش همچنین نشان میدهد که تفاوت آللی معنی داری بین گروه ناقل و گروه سالم در جایگاه Taq I وجود دارد (oR=0.66، p=.02). به هر حال تفاوت قابل توجهی بین جایگاه Apa I و Fok I وجود ندارد. نتایج بدست آمده نشان دهنده این موضوع میباشد كه وجود آلل b پس از آلودگی به HTLV-1 در جایگاه Bsm I نقش مهمی در ایجاد بیماری HAM/TSP دارد.

كلمات كلیدی: گیرنده ویتامین D، پلی مورفیسم، ، HTLV-1

نسرین محقی، هوشنگ رفعت‌پناه، جلیل توكل افشاری، محمد رضا آذر پژوه، عقیق ضیایی

اولین كنگره بین المللی HTLV-І و بیماریهای وابسته در ایران، 29 بهمن تا اول اسفند 1388، مشهد، ایران، س- 36

مقدمه: ویروس لوسمی  -Tسل انسانی تایپ I (HTLV-1) عامل اتیولوژیك میلو پاتی/ پاراپارزی اسپاستیك گرمسیری (HAM/TSP) می باشد. این ویروس در ناحیه شمال شرق ایران آندمیك می باشد. ویروس HTLV-1 ژن تنظیم كننده نسخه برداری را بنام tax كد می نماید. نشان داده شده است كه این ژن در بروز تعدادی از ژنهای فاكتور های پاسخ سرمی دخا لت دارد. بسیاری از ژنهای سلولی نظیر IL-3، IL-2، IL-1α، VEGF، GM-CSF، MCP-1، IFN-γ، TNF-β، IL-10، IL-8، IL-6 6توسط TAX فعال می گردد. بیماران VEGF اخیرا گزارش گردیده است كه افزایش غلظت پلاسمایی VEGF بعنوان فاكتور رگزایی در بیماران ALT بطور معنی داری افزایش می یابد. در این مطالعه ما غلظت سرمی VEGF را در بیماران مبتلا به HAM/TSP و ناقلین HTLV-1 و افراد سالم بررسی نمودیم.

مواد و روشها: غلظت سرمی VEGF a در 34 بیمار HAM/TSP و 29 ناقل HTLV-1 و 28 نمونه سالم كنترل توسط روش الیزا و با استفاده از كیت (Bender Med Systems GmbH, Austria) انجام گردید.

نتایج: نتایج ما معرف بالاتر بودن سطح VEGFa در بیماران HAM/TSP و ناقلین HTLV-1 نسبت به گروه كنترل سالم بوده است.(به ترتیب P=0.00, P=0.00). هیچ تفاوت معنی داری در بیماران HAM/TSP و ناقلین HTLV-1 (P<0.05) دیده نشد. بر طبق این نتایج بنظر می رسد VEGF a در عفونت  HTLV-1نقشی را دارا باشد.

كلمات كلیدی: VEGF a، HTLV-1، HAM/TSP، ژن tax

آرزو عبدی، فرزاد ملاحسینی، محمد رضا هدایتی مقدم، هوشنگ رفعت‌پناه

سومین همایش بین‌المللی ایمونولوژی، آسم و آلرژی و اولین سمپوزیوم آلرژی غذایی و دارویی، 14 تا 17 اردیبهشت 1395، مشهد، ایران

مقدمە: ویروس لنفوتروپیک انسانی تیپ١ با دو نوع اصلی از بیماریها در ارتباط است: لنفوم سلول T بالغین (ATL) و میلوباتى مرتبط با HTLV-١/ تروپیکال اسپاستیک پاراپارزیس (HAM/TSP). مشخص نیست كه چرا كمتر از 5 درصد از افراد آلوده به HITLV-١ به سمت بیماریهای مرتبط با HITLV-١ پیشرفت می‌کنند و بقیه برای تمام عمر به صورت ناقلین سالم باقی می‌مانند. تفاوت در پاسخهای ایمنی میزبان، ممکن است نقش مهمی را در بازده عفونت داشتە باشند. ما در این مطالعه الگوی مارکرهای ایمنى افراد حامل HITLV-١ و غیر حامل را در شمال شرقى ایران، مشهد مقایسە کردەایم.

روش کار: در این مطالعه ٣٩ نفر کنترل سالم و ٣٩ نفر حامل HTLV-١ بررسی گردیدند.

یافته‌ها: در گروههای حامل و غیرحامل، میانگین سنی بە ترتیب 40,1 ± 4,10 و 40 ± 1,10 بود. در ارزیابی ارتباط بین دو گروە مورد مطالعە، تفاوت قابل توجهی برای SIL2R (٠,٠001P<) مشاهدە شد. همچنین ارتباط معناداری بین گروههاى حامل و غیر حامل براى HsCRP (٠,005P=) وجود داشت و میانگین مارکر Anti-VCA كاهشی را در گروە نرمال نسبت بە گروە HC نشان داد (٠,007P=). درمیان حاملین، ارتباط معنادارى بین نئویترین و sCD30 (٠,003P=)؛ SIL2 و sCD30 (٠,05P<)؛ SILD2 و HsCRP (٠,032P=)؛ anti VCA و ماركرهایى شامل EBNA (٠,002P=)، EA (٠,049P=) و HsCRP (٠,024P=) وجود داشت.

نتیجە‌گیری: بەنظرمیرسد که بعضی از مارکرها مانندSILD2  و HsCRP نقش مهمی را در تشخیص HTLV-1 دارند و می‌توانند به عنوان فاکتورهای پیش‌آگهی و شاخصهای وضعیت بیماری مورد توجه قرار بگیرند.

كلمات كلیدى HTLV-١،ماركرهای ویروسی، سنجشهای ایمنى

منصور صالحی، جلیل توكل افشاری، امیررضا تفرشیان، عباس رضایی

اولین كنگره بین المللی HTLV-І و بیماریهای وابسته در ایران، 29 بهمن تا اول اسفند 1388، مشهد، ایران، پ – 31

مقدمه: ویروس HTLV‐1 یك ویروس متعلق به خانواده رتروویروسها و عامل دو بیماری مهم ATL وHAM/TSP  است. همچنین برخی بیمار یهای خودایمنی نظیر uveitis و polymiositis در ارتباط با این ویروس شناخته شده اند. اطلاعات اپیدمولوژی نشان م یدهد كه زمینه ژنتیك در پاسخ ایمنی به این ویروس نقش بسیار تعیین كننده ای دارد. هدف از این مطالعه بررسی ارتباط بین ژنوتایپ HLA‐DQB1 با احتمال ابتلای به ویروس HTLV‐1 بود.

روش: جامعه مورد بررسی 66 نفر بودند. گروه بیمار 16 نفر مبتلا به HAM/TSP ، گروه ناقلین ویروس 20 نفر و گروه افراد سالم 30 نفر را تشكیل م یدادند. از تمامی افراد تست Eliza جهت HTLV‐1 انجام شد و در صورت مثبت بودن تست Eliza در برای تأئید آلوده بودن به ویروس Western Blot انجام شد. افراد مبتلا به HAM/TSP كه HTLV‐1 مثبت بود توسط متخصص مغز و اعصاب معاینه و با توجه به علائم كلینیكی و آزمایشگاهی تشخیص داده شدند. نمونه خون این افراد گرفته شد و DNA آن استخراج گردید و سپس بر روی DNA این افراد HLA‐DQB1 تایپینگ به روش PCR‐SSP انجام شد. و سپس بوسیله آزمون دقیق فیشر درصد فراوانی و مقدار p value آنها را تعیین كردیم.

نتایج: آلل HLA‐DQB1-07 در مقایسه با افراد سالم با Relative Risk (RR) برابر 7 اختلاف معنی داری را نشان داد (P=0.004). بررسی آماری همچنین نشان داد كه احتمال ابتلای افرادی كه واجد آللهای HLA‐DQB1-2 یا HLA‐DQB1-5 هستند تنها 20 % افراد دیگر است.

بحث: نتایج حاصل از این مطالعه نقش HLA‐DQB1 را را در افزایش احتمال ابتلا و نقش محافظتی دو آلل HLA‐DQB1-2 و HLA‐DQB1-5 را در ارتباط با HTLV‐1 اثبات نمود.

واژه های كلیدی: HTLV-1، HAM/TSP ، HLA،PCR-SSP

جلیل توكل افشاری، امیر رضا تفرشیان، راشین گنجعلی، منصور صالحی، عباس رضایی، رضا فریدحسینی

اولین كنگره بین المللی HTLV-І و بیماریهای وابسته در ایران، 29 بهمن تا اول اسفند 1388، مشهد، ایران، س – 27

مقدمه: ویروس HTLV-1 اولین رترو ویروس انسانی است كه دارای مناطق اندمیك محدود در جهان است كه یكی از این مناطق در كشور ایران و در استان خراسان واقع شده است كه میزان شیوع این ویروس در این منطقه اندمیك 3/2 درصد گزارش شده است. ثابت شده است كه این ویروس عامل دو بیماری مهم و شناخته شده ATL یا Adult T cell lymphoma and leukemia و بیماری HAM/TSP یا HTLV-1 Associated Myelopathy می باشد. افراد مبتلا به ویروس HTLV-1 ریسك كمتر از 2-1 درصد برای پیشرفت هر كدام از بیماریها را دارند. اطلاعات اپیدمولوژی نشان می دهد كه زمینه ژنتیك و پاسخ ایمنی به ویروس نقش بسیار تعیین كننده ای در ابتلا به بیماری در افراد ناقل به ویروس را دارد. مطالعات نشان داده است كه HLA (Human Leukocyte Antigen) كلاس II هاپلوتایپ  DQB1در HAM/TSP بیشتر مؤثر هستند. لذا برآن شدیم وجود ارتباط بین HLA-DQB1 و HAM/TSP در منطقه اندمیك استان خراسان را مورد بررسی قرار دهیم.

مواد و روش ها: نمونه خون 16 بیمار HAM/TSP، 20 بیمار ناقل HTLV-1 و و 30 فرد سالم را گرفته و DNA خون این افراد را به روش salting out استخراج و سپس بر روی DNA خون این افراد HLA-DQB1 تایپینگ به روش PCR-SSP انجام داده و سپس بوسیله آزمون دقیق فیشر درصد فراوانی و مقدار p value آنها تعیین شد .

نتایج و بحث: آلل HLA-DQB1-07 در مقایسه با افراد سالم با و   p value=0.004و Relative Risk (RR) = 7 اختلاف معنی داری را نشان داد. همچنین مشخص شد كه افرادی كه دارای آلل HLA-DQB1-2 یا HLA-DQB1-5 می باشند 5/1 افراد دیگر مستعد بیماری هستند كه این دو آلل را میتوان جز آلل های محافظتی یا protective منظور نمود كه ارتباط  HAM/TSPبا HLA-DQB1 را اثبات می نماید. همچنین كسانی كه HLA-DQB1-7 و HLA-DQB1-6 را با هم داشته باشند در صورت آلوده شدن به ویروس HTLV-1 با احتمال بیشتری به سمت بیماری HAM/TSP پیش می روند.

واژه های كلیدی: HTLV-1، HAM/TSP ، HLA،PCR-SSP

ندا یعقوبی، فرناز زاهدی اول، مسعود یوسفی، فرامرز فرزاد

اولین همایش ملی مدیریت و کنترل عفونت‌های منتقله از خون، 2 تا 4 آبان 1397، مشهد، ایران

زمینه: ویروس لنفوتروپیک سلول T انسانی (HTLV-I)، اولین رتروویروس انسانی شناخته شده است . عوارض جدی مرتبط با این ویروس شامل لوسمی سلول T (ATLL) و فلج اسپاستیک میلوپاتیک (HAM-TSP) می­باشد. این مطالعه در جهت یافتن ارتباط بین عدم تعادل اکسیدانت و آنتی اکسیدانت های بدن به عنوان یکی از مکانیسم­های بیماری زایی ویروس HTLV-I با وضعیت بالینی افراد آلوده به ویروس، طراحی گردید.

مواد و روش‌ها: نمونه خون 40 فرد آلوده به ویروس در دو گروه ناقل بدون علامت و HAM-TSP در مقابل 40 فرد سالم، بررسی شد. فعالیت آنزیم تیوردوکسین ردوکتاز (آنتی اکسیدانت) با استفاده از کیت تجاری و بیان ژن با تکنیک Real Time PCR در لنفوسیت‌های خون محیطی سنجیده شد.

یافته‌ها: میانگین ±  انحراف معیار فعالیت آنزیم در گروه HAM-TSP برابر0.047 ± 0.0928، در گروه ناقل بدون علامت  0.065± 0.134و در گروه کنترل  0.056±0.173 (µmol/min/ml) بود. اختلاف بیان ژن در گروه های HAM-TSP و ناقل به ترتیب 0.7 و 0.8 در برابر 1 در گروه کنترل بود .

نتیجه‌گیری: کاهش فعالیت و بیان ژن آنزیم تیوردوکسین ردوکتاز در گروه آلوده به ویروس HTLV-I ، احتمالا با تشدید استرس اکسیداتیو ، در بروز عوارض جدی مرتبط با ویروس نقش دارد .

کلمات کلیدی: تیوردوکسین ، HTLV-I ، Real Time PCR

جلیل توكل افشاری، رضا فریدحسینی، اعظم بروك، آتوسا انزوایی، راشین گنجعلی، مهرداد رادور، نسرین محقی

اولین كنگره بین المللی HTLV-І و بیماریهای وابسته در ایران، 29 بهمن تا اول اسفند 1388، مشهد، ایران، س – 25

ویروس HTLV1 عضوی از خانواده Retroviridae علت حداقل دو بیماری مهم در انسان است. ATL و پاراپارزی اسپاتیك گرمسیری كه میلوپاتی ناشی از HTLV-1 هم نامیده میشود. با توجه به شیوع سرواپیدمیولویك ویروس HTLV-1 در شهر مشهد (3/2%) و بالتبع شیوع بیماری HAM/TSP در حاملین این ویروس، بر آن شدیم به بررسی نقش فرایند ایمنی در این بیماران و مقایسه نحوه پاسخ ایمنی در بیماران HAM/TSP نسبت به افراد ناقل HTLV-1 و افراد سالم بپردازیم.

مواد و روش ها: به این منظور تعداد 20 بیمار كه ابتلا به ویروس HTLV-1 آنها به روش ELISA و تایید آن توسط Western Blot ثابت شده بود و علائم بالینی پاراپارزی اسپاتیك قابل انطباق با HAM/TSP  را داشتند و مبتلا به روند التهابی دیگری نبودند. از بین مراجعه كنندگان 19 نفر فرد ناقل HTLV-1 كه تظاهرات كلینیكی نداشتند و به بیماری التهابی دیگری مبتلا نبودند و نیز تعداد 20 نفر از افراد سالم بدون درگیری ویروسی ثابت شده و یا ابتلا به بیماری التهابی، بدون احتساب سن و جنس انتخاب شدند و سرم، برای شناسایی سطح سرمی IFN-Υ و IL-4 به روش ELISA تحت بررسی قرار گرفت.

نتایج: سطح سرمی IL-4 و IFN-Υ در افراد سالم و گروه ناقل HTLV-1 در حد قابل ارزیابی نبود. مقدار سرمی IL-4 در 2 نفر از افراد مبتلا به HAM/TSP قابل شناسایی بوده و مقدار سرمی IFN-Υ در 6 نفر از افراد مبتلا به HAM/TSP قابل سنجش به دست آمد. در مقایسه سطح سرمی IL-4 بین سه گروه HAM/TSP ناقل HTLV-1 و افراد سالم پاسخ آماری اختلاف ارزشمندی بدست نداد (p=0.138) ولی مقایسه سطح سرمی IFN-Υ بین سه گروه فوق: افراد HAM/TSP ناقل HTLV-1 و افراد سالم با p=0.002 از نظر آماری قابل توجه بود.

بحث و نتیجه گیری: با توجه به اینكه IFN-Υ سیتوكین پاسخ التهابی نوع Th1 و IL-4 سیتوكین ترشح شده از Thelper های نوع 2 میباشد میتوان نتیجه گرفت كه مثبت بودن سطح سرمی IFN-Υ در افراد HAM/TSP نسبت به افراد سالم و ناقل و همچنین منفی بودن IL-4 در افراد HAM/TSP كه با افراد سالم و ناقل مشابه است، دلالت بر تبدیل پاسخهای التهابی به سمت Th1 در این گروه از بیماران دارد كه با نتایج بدست آمده از یافته‌های مطالعات قبلی در گروههای دیگری از بیماران مطابقت نموده است.

كلمات كلیدی: HTLV-1، HAM/TSP، بالانس Th1/Th2، IL-4، IFN-Υ

محمود رضا آذرپژوه، احمد عظیمى، محمد مهدى اعتمادى، ل. افشار، هوشنگ رفعت‌پناه، عبدالرحیم رضایی، رضا فریدحسینی، محمد جواد فروغی پور، محمود محمودى

هفتمین همایش بروهشى سالیانه دانشجویان دانشگاه‌هاى علوم پزشكى شرق كشور، 25 تا 27 آبان ماه 1397، مشهد، ایران

فصلنامه علمى پژوهشى نوید نو، دوره 15، شماره ٥٣، بایبز ١٣٩٠

مقدمه: میلوپاتى مرتبط  HTLV-I/ پاراپارزى اسپاستیک تروپیكال (HAM/TSP) یك نوع میلوپاتی مزمن است که توسط HTLV-I  ایجاد می‌شود عفونت HTLV-I در مناطق معدودى از دنیا و از جمله در شمال شرق ایران اندمیک است. مکانیسم و فیزیوتراپی HAM/TSP هنوز به طور کامل شناخته نشده است، از این رو دست یابی به یک دارو درمانی موثر یک مسئله مهم به حساب می‌آید. این مطالعه به منظور ارزیابی تأثیر اینترفرون ـ آلفا در درمان بیماران مبتلا به HAM/TSP در شمال شرق ایران طراحی شد.

روش بررسى: 49 بیمار با تشخیص قطعى HAM/TSP بر طبق معیارهای سازمان بهداشت جهانی، در این مطالعه (کارآزمایی بالینی) وارد شدند. بیماران با روزانه 3 میلیون واحد بین المللی اینترفرون ـ آلفا زیرجلدی، به مدت 6 ماه تحت درمان قرار گرفتند. پاسخ بالینی و آزمابشگاهی به کمک تست‌های نورولوژیک و مارکرهای ایمونو ـ ویروسی شامل بار ویروسی، تیتر آنتی بادی ضد HTLV-I و مارکرهای فنوتیپی لنفوسیت‌ها، قبل و بعد از درمان ارزیابی شدند.

نتایج: این مطالعه نشان داد كه ایتترفرو ن ـ آلفا اثرى مهم اما موقت و گذرا روی عملكرد ادراری و حركتی بیماران دارد. بار ویروسی و تیتر آنتی بادی ضد HTLV-I در یک ماه بعد از درمان کاهش معنی داری نشان دادند. اما بررسی فلوسایتومتری تغییر معنی داری نشان دادند. امام بررسی فلوسایتومتری تغییر معنی داری در مقادیر CD4، CD8، CD25 CD4 و CD56 CD16  نشان دادند.

نتیجه‌گیری: این مطالعه نشان‌گر تأثیر قابل ملاحظه‌ی اینترفرون ـ آلفا بر برخی جنبه‌های ناتوانی در بیماران HAM/TSP بود. هرچند این تأثیر مثبت تنها در دوران مصرف دارو مشاهده شد. باتوجه به اهمیت و شدت این بیماری و نقش درمان به موقع در کاهش بار بیماری و عوارض آن، بایستی مطالعات بیش تری در این زمینه با حجم نمونه ی بیش تر و مدت پیگیری پس از درمان طولانی تر در کنار ترکیب داروهای ضد ویروسی و تنظیم کننده ی سیستم ایمنی انجام شود.

واژه‌های کلیدی: HTLV-I، HAM/TSP ، اینترفرون ـ آلفا

فرزاد ملاحسینى

هفتمین همایش بروهشى سالیانه دانشجویان دانشگاه‌هاى علوم پزشكى شرق كشور، 25 تا 27 آبان ماه 1397، مشهد، ایران

فصلنامه علمى پژوهشى نوید نو، دوره 15، شماره ٥٣، بایبز ١٣٩٠

مقدمه: 1-HTLV نوعى رتروویروس انسانى است كه با ایجاد ATL و HAM /TSP و برخى بیماریهاى دیگر ارتباط دارد. با این حال كمتر از 5 درصد جمعیت آلوده به سمت ATL یا HAM/TSP بیشرفت مى‌ كند كه علت آن مشخص نشده است. البته مطالعات صورت گرفته حاكى از درگیرى سیستم ایمنى در ناقلین ویروس بوده بصورتیكه پیشرفت ناقلین به سمت بیماریهای مرتبط یا این ویروس رابطه اى نزدیک با شدت و نوع یاسخ ایمنى دارد.

روش بررسى: در این طرح تعداد ٧٧ تفر از اهداكنندگان مراجعه‌کننده به اتنقال خون مشهد شامل یك گروه ٣٩ نفرى كنترل سالم و یك گروه ٣٨ نفرى ناقل ویروس كه از نظر سنى و جنسى تطابق داشتند، شركت داشتند. آزمایشات ماركرهای سیستم ایمنى بدن شامل sIL2R و sCD30 و Neopterin و شاخص فعالیت ویروس یعنى تیتر آنتى‌بادى به روش الیزا و طبق دستور العمل كیت انجام و نتایج حاصل با نرم‌افزار  SPSS نسخه ١٣ یررسى شد.

نتایج: یس از آنالیز تتایج حاصل از انجام آزمایشات میانگین سطح sIL2R (p<0.001) و sCD30 (p=0.006, z=-5.8) و   z=2.8 افزایش معنى‌دارى در گروه ناقل نسبت به كروه كنترل سالم مشاهده شد. همچنین ماركر Neopterin در ناقلین ویروس با تیتر آنتى‌بادى ضد 1-HTLV داراى همبستگى معنى‌دار بود (p=0.039) و (r=0.34)

نتیجه‌گیرى: یا توجه به نتایج بدست آمده الگوى پاسخ ایمنى منطیق با پاسخ ایمنى سلولار Th1)) مى‌باشد و فعال بودن سیستم ایمنی بدن ولنفوسیت‌هاى T در جمعیت ناقل ویروس نسبت به گروه كنترل سالم مشاهده مى‌شود بنابراین احتمال پیشرفت ناقلین به سمت بیماریهاى وایسته به 1-HTLV در ابن ناحبه اندمیك را میتوان متصور شد كه تقویت این موضوع نیازمند تحقیقات بیشتر در زمینه یاسخ‌هاى ایمنى و همچنین مطالعاتى یا حجم نمونه بیشتر دارد.

واژه‌هاى كلیدى: ماركرهاى ایمنى عفونت 1-HTLV، ماركرهاى ویروسى HTLV-1

محمود ترکمنی، سید عبدالرحیم رضایی، هوشنگ رفعت‌پناه، براتعلی مشکانی

ششمین کنگره میکروبشناسی بالینی ایران و اولین کنگره بین المللی میکروبشناسی بالینی، مرداد 1391، مشهد، ایران

مقدمه وهدف: ویروس سلولT انسانی نوع یک(HTLV-I) یک رتروویروس انکوژن انسانی است كه عامل بیماری لوسمی سلول های T بالغین و بیماری فلج اسپاستیك گرمسیری HAM/TSP تنها در2-3%افراد آلوده می شود. مطالعات قبلی نشان می دهد كه عفونت HTLV-I درخراسان رضوی اندمیك است ،بخصوص درشهر های مشهد و نیشابور. این منطقه به دلیل عوامل مختلف ازقبیل الگوی مهاجرتی، محیط و رفتار های پرخطر در حال حاضر بیشتزین شیوع را در ایران دارد . هدف ازاین مطالعه تعیین میزان شیوع عفونت و آنالیز فیلوژنی ویروس HTLV-I در تربت حیدریه در شمال شرقی ایران است.

روش‌ها: بین آوریل و ژوئن 2011 تعداد 400 نمونه سرم به طور تصادفی جمع آوری شدند. ابتدا برای تعیین وجود آنتی بادی های ضدویروسHTLV-I/II تست ELISA (کیت دیاپرو/ایتالیا) و برای موارد مثبت و نامعین تست های تاییدی WB و PCR انجام شد. DNA ژنومی با استفاده از كیت استخراج DNA ازسلول های خون محیطی (PBMCs) با روش هضم آنزیمی استخراج و ژن tax و ناحیه LTR ویروس با استفاده از پرایمرهای اختصاصی با روش PCR تكثیر شدند. سه نمونه از 5 نمونه مثبت برای تعیین توالی و آنالیز فیلوژنتیک ناحیه LTR انتخاب شدند. درخت فیلوژنتیک با استفاده از نرم افزار Geneious رسم شد.

نتایج: درغربالگری اولیه با روش ELISA هشت نمونه (2%) برای آنتی بادی های ضد HTLV-I مثبت بودند که تنها 5 مورد (25/1%)با تست های تاییدی WB و PCR مثبت شدند (3مرد و2زن). تنها ارتباط معنی داری بین میزان شیوع عفونت با افزایش میانگین سن وجود دارد. آنالیز فیلوژنتیک نشان می دهد که HTLV-I درتربت حیدریه وابسته به زیر گروه جهانی است.

بحث: مطالعه حاضر نشان می دهد که عفونت HTLV-I در تربت حیدریه وجود دارد و باتوجه به این كه درمان اختصاصی خاص و كاملا موفقیت آمیزی جهت بیماران مبتلا به HTLV-I وجود ندارد لذا شناسایی افراد آلوده و تعیین میزان آلودگی دریك منطقه می‌تواند به شناسایی روشهای انتقال و پیشگیری ازشیوع ویروس و بیماری‌های وابسته درمنطقه مورد مطالعه كمك كند. از این رو غربالگری روتین در بین اهداکنندگان خون همراه با استراتژی های دیگر برای جلوگیری از انتقال ویروس ضرورت دارند. همچنین غربالگری سیستمیک HTLV-I در اهداکنندگان خون در شهرهای دیگر استان خراسان اهمیت دارد و باید در نظر گرفته شود.

کلمات کلیدی: HTLV-I شیوع، فیلوژنیك، PCR ، ایران

محمود پناهی

خلاصه مقالات چهارمین کنگره سراسری بیماری‌های عفونی و گرمسیری ایران، 1372، تهران، ایران، صفحات 46-45

گرچه رتروویروس ها از گذشته دور شناخته شده بودند ولی ارتباط آن با انسان در دهه 1980 بررسی گردید و با مطالعه T-Cells بیماران Adult.T.Cell.Leukemia معلوم شد كه حاوی ویروسی هستند به اسم HTLV-1 و یا Human. T.Cell.Lymph Virus Type 1 و در 1985 بیماری Tropical Spastic paraparesis به عنوان بیماری دیگر با علت HTLV-1  شناخته شد (جاماییكا- تری نیداد) .و بعد بیماری دیگری در ژاپن شناخته شد به اسم HTLV-1 Associated Myelopathy . از نظر ساختمانی HTLV-1 شبیه سایر رترو ویروس ها و نهایتاً دارای قسمتهای gag و pol و env می باشد. HTLV-1 به علاوه دارای رژیون PX می باشد كه به نظر می رسد موجب فعال شدن Host Genes می شود. اخیراً به لیست بیماریها، بیماری HTLV-1 Associated Arthropathy نیز اضافه شده كه به صورت آرتریت انفلاماتوار می باشد و HTLV-1  در مایع سینوویال و سرم این بیماران پیدا می شود. ویروس HTLV-1 تروپیسم خاص به مغز و جسم سفید دارد و نیز اولیگودندروسیت ها و آستروسیت ها مورد تهاجم این ویروس قرار می گیرند. در میلوپاتی معلول این ویروس به نظر می رسد یك بیماری اتوایمون باشد. بیماریهای حاصله از ویروس HTLV-1 از نظر اپیدمیولوژی در مناطق خاصی از دنیا شیوع بیشتری دارد كه این موضوع فاكتورهای ژنتیك را مطرح می نماید. در حالی كه آلودگی ویروس در اكثر نقاط دنیا ملاحظه می‌شود. منجمله در ایران خصوصاً در خراسان بیماری از انسیدانس بالایی برخوردار است. در میلوپاتی حاصل از HTLV-1 درمان خاصی صورت نمی گیرد گو اینكه كورتیكوستروئیدها در 50% این بیماران موثر واقع می شود كه روش اثر آن قابل سوال است. شیمی درمانی استاندارد نیز در Adult T.Cell Leukemia مفید واقع می‌شود.

رضا فرید حسینی، محمود محمود ی، محسن فروغی پور ، زهرا صبوری، زهرا عباسپور، سیاوش درخشان

اولین كنگره بین المللی HTLV-І و بیماریهای وابسته در ایران، 29 بهمن تا اول اسفند 1388، مشهد، ایران، س- 44

مقدمه: بیماری HAM/TSP (فلج اسپاستیك حاره ای/ میلوپاتی وابسته به HTLV-1) یك بیماری سیستم عصبی است كه در 1-2% افراد آلوده به HTLV-1 دیده می شود. بار پرو ویروس HTLV-1 آلل های معین HLA و زیر گروه Tax HTLV-1 تا بحال در كاگوشیمای ژاپن نشان داده شده است كه در ایجاد HAM/TSP دخیلند و این ریسك فاكتورها در این مطالعه در بیماران ایرانی مورد بررسی قرار گرفتند.

مواد و روشها: جمعیت مورد مطالعه شامل 58 بیمار HAM/TSP و 74 مورد ناقل سالم بود كه بیمار و ناقل بودن نمونه ها توسط یك متخصص مغز و اعصاب تائید شده بود. ابتدا 5 سی سی خون وریدی از نمونه ها گرفته شد و بعد از اضافه كردن 5/0 سی سی EDTA به نمونه ها به پژوهشكده بو علی منتقل و در دمای 20 – درجه سانتی گراد نگهداری شد. و سپس با استفاده از كیت جنترا عملیات استخراج DNA صورت گرفت. جهت تعیین بار پروویروس و شناسایی مورد نظر نمونه ها به ژاپن منتقل شد.

نتایج: در بیماران HAM/TSP ایرانی میزان بار ویروس بطور معنی داری كمتر از كاگوشیما است. اگر چه  HLA-DRB1*0101 در صورت عدم وجود HLA-A*02 احتمال ابتلاء بیماری HAM/TSP را در بیماران ژاپنی را بالا می برد. HLA-A*02 و Cw*08 تاثیری در ابتلاء بیماری HAM/TSP و بار پرو ویروس HTLV-1 ندارد. تمام ایرانی ها زیر گروه tax-A می باشند و اثر HLA-A*02 بر روی بار پرو ویروس و ایجاد بیماری فقط در بیماران ژاپنی كه زیر گروه tax-B هستند دیده شده است.

بحث: وجود HTLV-1 خطرناك (tax-A) و ژنهای دیگر HLA در ایران و همچنین تفاوت عوامل محیطی ممكن است این اختلافها را در دو جمعیت توجیه كند. مطالعات تكمیلی با حجم نمونه بالاتر نیاز است.

محمد رضا عباس زادگان، عبدالرضا وارسته، محمد خوشرو، بهجت غلامی، مهران غلامین

مجموعه مقالات نخستین همایش ملی بیوتكنولوژی، 1378، مرکز ملی تحقیقات مهندسی ژنتیک و تکنولوژی زیستی، تهران، ایران، صفحات 545-541

عفونت سلولهای T انسان توسط ویروس HTLV 1  باعث رشد غیر قابل کنترل این سلولها شده که موجب لوسمی سلول T بالغین (ATL) می شود. ترانسفر میشن سلولهای T در مراحل اولیه ATL توسط پروتئین TAX ویروس HTLV 1  صورت می گیرد. علاوه بر ATL  این ویروس عامل بیماریهای دیگری مانند پاراپارزی اسپاتیک (HAM/SP) می‌باشد. استان خراسان به خصوص شهر مشهد یک منطقه اندمیک HTLV-­­1 با شیوع حدود 3 درصد می باشد. هم اکنون تشخیص این آلودگی عمدتاً در مراکز انتقال خون کشور به خصوص به صورت روتین در مشهد توسط تست ELISA  و تأیید آن با وسترن بلات انجام می شود. در تمامی این کیتها که سالیانه ارزبری قابل توجه ای دارند می توان از پروتئین TAX استفاده نمود. هدف ما در این پروژه تهیه پروتئین TAX توسط تکنولوژی ریکامبیننت DNA  در E.coil بود. بعد از تهیه این پروتئین، روش ایمونوافینیتی کروماتوگرافی را در خالص سازی آن بکاربردیم. توسط روشهای  Western-Bloting ، SDS-PAGER  پروتئین TAX  خالص شده شناسایی و خلوص آن بررسی گردید.

سعید سمرقندیان، سید حیدر طبسی، سعیده داودی

اولین كنگره بین المللی HTLV-І و بیماریهای وابسته در ایران، 29 بهمن تا اول اسفند 1388، مشهد، ایران، پ- 29

ویروس تیپ 1 لنفوتروپیك سلول T انسانی (HTLV-1) در پیشرفت انواع زیادی از ناهنجاری های التهابی شامل  التهاب مفاصل، التهاب عضلانی و التهاب كیسه های هوا یی ایفای نقش می كند. اگر چه مكانیسم بیماری زایی HTLV-1 هنوز به طور كامل شناخته نشده، اما به نظر می رسد كه سایتوكین های تولید شده با سلول های آلوده شده با HTLV-1 شامل IL-2، IL-1 و IL-6 در پیشرفت این بیماری موثر باشند. HTLV-1 فاكتور TAX را كد می كند كه كه غیر از نسخه برداری از ژنوم ویروسی سبب بیان انواع مختلفی از ژنهای سلولی می شود. ژنهای سلولی هدف TAX که تاكنون مشخص شده است شامل TGF-β، TNF-α، IL-4، IL-3، IL-2 و گیرنده IL-2، GM-CSF و c-fos می‌باشد. نفوذ پذیری عروقی به خصوص در مویرگ های مغزی به شدت كنترل می شود، بنابر این عواملی كه بتوانند این نفوذ پذیری را تغییر دهند از دیدگاه فیزیو لوژیكی قابل اهمیت هستند.اینترلوكین ها و TNF-α به وسیله فاگوسیت های تك سلولی ، سلول های اندوتلیال و فیبروبلاست آزاد می شوند و در بسیاری از پاسخ های سلولی از جمله تغییر نفوذ پذیری رگها مشاركت دارند. با ردیابی این ویروس در سیستم عصبی مركزی بیماران TSP/HAM توانایی  HTLV-1برای عبور از سد خونی- مغزی مشخص شده است.لنفوسیت های آلوده شده با HTLV-1، می‌توانند نفوذ پذیری پاراسلولی دراندوتلیال تك لایه را دو برابر كنند. احتمال می رود میان این اثرات و افزایش تولید TNF-α به وسیله لنفوسیت های آلوده شده با HTLV-1، ارتباط معناداری وجود داشته باشد. در لنفوسیت های آلوده شده با HTLV-1، ویریون ها با جوانه زنی سریع از لنفوسیت ها جدا شده و به وسیله وزیكول های سلول های اندوتلیال مغزی به سمت بازولترال آزاد می شوند و به نظر می رسد با استفاده از مسیر های transcytotic از سد خونی- مغزی عبور می كنند.

نتیجه گیری: مسیرهایی كه HTLV-1 ممكن است با استفاده از آنها از سد اندوتلیال عبور كند و ما پیشنهاد میكنیم كه مححققین در مطالعات خود مد نظر قرار دهند: 1. مسیر مستقیم لنفوسیت های آلوده شده بعد از تخریب اندوتلیال تك لایه 2. اندوسیتوز ذرات ویروسی به دنبالtranscytotic  3. آلوده كردن سلول های اندوتلیال. ین مسیرهای پیشنهادی می تواند به شناخت سریعتر مكانیسم بیماری های عصبی ایجاد شده باHTLV-1  كمك كند.

مهدى فعله گرى، عبدالرحیم رضایى، حمید فرجى، ترانه رجایى

هفتمین همایش بروهشى سالیانه دانشجویان دانشگاه‌هاى علوم پزشكى شرق كشور، 25 تا 27 آبان ماه 1397، مشهد، ایران

فصلنامه علمى پژوهشى نوید نو، دوره 15، شماره ٥٣، بایبز ١٣٩٠

مقدمه: 1-HTLV نوعى رتروویروس انكوژن انسانى است كه در 1 تا 5 درصد افراد آلوده، بیماری‌هایى نظیر ATL و HAM/TSP ایجاد مى‌كند. HAM/TSP یک بیمارى التهابى سیستم عصبى مركزى است كه در آن میلین زدایی تدریجی در CNS رخ مى‌دهد. در  این فرایند كموكاین‌ها با جذب سلول‌هاى التهابى به CNS نقش مهمى در گسترش التهاب ایفا مى‌کنند. در این راستا براى شناخت بیشتر كموكاین‌ها و گیرنده‌های آنها در فرایند التهابی CNS بیماران HAM/TSP اقدام به طراحى آزمایشی بر پایه تكنیك‌هاى Real time -PCR و ELISA نمودیم.

روش بررسی: هدف از این آزمایش بررسى بروز كموكاین رسپتورهای CXCR3 و CCR6 در لنفوسیت‌هاى خون محیطى با استفاده از تكنیک  Real-time PCRو همچنین تعیین میزان كموكاین‌هاى CXCL9 و CXCL10 در سرم با استفاده از روش ELISA است. بر این اساس از ٨٥ نفر در سه گروه بیماران HAM/TSP، ناقلین بدون علامت و افراد سالم خون محیطى دریافت شد. بعد از استخراج RNA و سنتز cDNA، تكنیك Real-time PCR برروى نمونه‌ها صورت گرفت. همچنین براى پى بردن به نقش كموكاین‌ها در بیمارى HAM/TSP اقدام به اندازه گیرى مقدار كموكاین های CXCL9 وCXCL10 با روش ELISA در سه گروه ذكر شده نمودیم.

نتایج: نتایج بیانگر افرایش قابل ملاحظه بروز رسپتورهاى CXCR3 و CCR6 در بیماران HAM/TSP در مقایسه با افراد ناقل و سالم می‌باشد. همچنین میزان كموكاین‌هاى CXCL9 و CXCL10 در افراد ناقل و بیمار بیشتر از افراد سالم است.

نتیجه‌گیری: بر اساس این مطالعه و دیگر مطالعات که بر روی رسپتورهاى CXCR3 و CCR6 و در سایر بیماری های التهابی CNS انجام گرفته مشخص شده است که افزایش این دو گیرنده در بیماران نقش مهمی در عبور سلول‌های ایمنی از سد خونی مغزی و همچنین گسترش بیماری های التهابی سیستم عصبی مرکزی دارد.

واژه‌های كلیدی: HTLV-1، HAM/TSP، گیرنده كموكاین، Real-Time PCR

مهدی نیكبخت دستجردی

اولین كنگره بین المللی HTLV-І و بیماریهای وابسته در ایران، 29 بهمن تا اول اسفند 1388، مشهد، ایران، س- 37

مقدمه: ATL با ورود DNA مربوط به HTLV-1 به داخل سلول های تومری مرتبط است ولی شیوع ATL در بین ناقلین HTLV-1 پائین می باشد و بنابر این مكانیسم های دیگری در ایجاد بیماری دخیل می باشد ازجله از كار افتادن ژن های مهار كننده تومر.

روش اجرا: فراوانی اللی پلی مورفیسم كدون شماره 72 ژن p53 در بین 50 فرد سالم ناقل HTLV-1 و 51 فرد مبتلا به ATL توسط روش Allele Specific PCR بررسی شد.

نتائج: فراوانی اللی از لحاظ آماری بین 51 فرد مبتلا به ATL و 50 فرد سالم ناقل HTLV-1 معنی دار بود (P=0.03). داده ها نشان می دهند كه پلی مورفیسم كدون شماره 72 ژن p53 می تواند در ایجاد ATL در بین ناقلین HTLV-1 نقش داشته باشد.

نتیجه گیری: p53 احتمالا از طریق تعدیل تاثیراش به عنوان یك فاكتور رونویسی دارای اهمیت عملكردی در انواعی از بدخیمی ها از جمله ATL است.

واژه های كلیدی: P53، ATL، پلی مورفیسم،HTLV-1

ساناز احمدى قزل‌دشت، حامد صادقیان، سید عبدالرحیم رضایى، محمود رضا آذریزوه، سید على اكبر شمسیان، هوشنك رفعت‌بناه، محمود محمودى

دومین كنفرانس ملى پزشكى مولكولى در تشخیص ودرمان بیمارى‌ها، 29 بهمن 1394، تهران، ایران

مقدمه: سلول‌های CD4 + CD25 + T نقش اساسی را در حفاظت از تحمل ایمنی و پیشگیری از بیماریهای خود ایمنی بازى مى‌کنند. در این مطالعه، نقش سلول‌های CD4 + CD25 + FOXP3 + Treg در بروز HAM /TSP مورد بررسى قرار كرفت.

روش بررسی: بار پروویروس و بیان زن FOXP3 و GITR و شمارش سلولهاى Treg در ٢١ بیمار HAM / TSP و 16 ناقل سالم HTLV-I با استفاده از Real-time PCR و فلوسیتومتری اندازه‌گیری شد.

یافته‌ها: شدت متوسط اختلال تحرک ٢,٣٧ ± 4,٨٢ که هیچ ارتباط آمارى معنادارى با تعداد Treg هستند و یا بیان FOXP3، GITR و بار پروویروسی ندارد شمارش+ CD4 + CD25 تفاوت آماری معنی دار در دو ګروه مورد مطالعه ندارد.

نتیجه‌گیری: نتایج بار پروویروس بالاتر در بیماران میلوپاتی در مقایسه با ناقلین سالم مشاهده شد (میانگین: ٣١٣,٣۶ نسخه / ١٠⁴ سلول تک هسته ای خون محیطی در برابر 144,٩٣)،(٠,٠٣5= P). سطح FOXP3mRNA و GITR در بیماران میلویاتى (میانكین به ترتیب ١١,٧٨ و ١٣,٨٠) نسبت به ناقلین سالم (به ترتیب 18,44 و ٢١,٠٠، ٠,٠4١ = P و ٠,٠٣= P) كمتر بود. همبستگی معنی داری بین فركانس سلول T تنظیمى و بیان زن FOXP3 وجود دارد (٠,٠06P=). GITR  و FOXP3 ارتباط معنى‌دارى در بیماران مبتلا به HAM / TSP دارند (٠,٠42P=). این یافته ها نشان مى‌دهد كه عفونت HTLV-I مى‌تواند عوامل رونویسی کاربردی اصلی در یاسخ های ایمنى را تغییر داده و تظاهرات بیمارى میلویاتى را سبب شود.

كلمات كلیدى: میلویاتى وابسته به HTLV-I، Foxp3; GITR، بار پروویروس، سلولهاى T CD4+CD25+